Acona 2000 SIS不溶性微粒仪微量进样能力验证
在研发样品筛查、过滤前后趋势对比、工艺节点确认或客户现场复核等场景中，样品体积往往十分有限。同一份样品通常需要完成粒径分布、理化指标、稳定性观察以及其他质量相关检测。若颗粒计数测试对进样体积依赖过强，不仅增加样品消耗，还可能导致重复取样、重新制样甚至延误判断节奏。
因此，微量进样能力的价值不应仅停留在“减少体积消耗”的层面，而应关注在体积降低条件下系统整体统计能力是否保持稳定。具体而言：第一，体积减小后计数重复性是否显著劣化；第二，浓度换算结果是否出现系统性偏移；第三，体积响应是否仍具备良好线性关系；第四，粒径分辨率是否因事件数减少而降低。
围绕上述问题，本次基于标准物质开展系统验证，从计数重复性、计数准确性与体积一致性、体积响应线性以及分辨率符合性等维度，对 Acona 2000 SIS不溶性微粒检测仪在微量进样条件下的综合性能进行评估。
一、验证条件和方法
Acona 2000 SIS不溶性微粒检测仪采用光阻/散射单颗粒计数原理，通过单颗粒信号识别统计颗粒数量，并将结果换算为单位体积浓度。（Count/mL）。
标准样品选用国家标准物质（NCRM）10 µm 乳胶微粒（GBW 09702，批号 N981），合格浓度范围为 2593~3134 粒/mL。
进样体积覆盖 50–1000 µL（50、150、250、350、450、550、650、1000 µL），每个体积条件下进行三次独立检测。数据处理包括四部分：计算各体积条件下的平均值与 RSD% 评价重复性；以平均浓度结果与合格区间进行对比，评价计数准确性；以颗粒总计数对进样体积进行线性回归，评价计数线性表现；并对各体积条件下计算 CP <0903> 分辨率与 USP <1788> 分辨率，评价分辨率符合性。
二、结果与讨论
|
VOLUME （uL） |
RUN 1（counts） |
RUN2（counts） |
RUN3（counts） |
AVERAGE（counts） |
AVERAGE（/mL） |
RSD |
CP分辨率 （≥68%） |
USP分辨率 （≤10%） |
|
1000 |
3033 |
3055 |
3053 |
3047 |
3047 |
0.40% |
168%，89% |
2.73% |
|
650 |
1983 |
1947 |
1981 |
1970 |
3031 |
1.04% |
181%，88% |
2.76% |
|
550 |
1595 |
1598 |
1660 |
1618 |
2941 |
2.27% |
179%，84% |
2.67% |
|
450 |
1350 |
1297 |
1332 |
1326 |
2947 |
2.04% |
174%，89% |
2.79% |
|
350 |
1087 |
1057 |
1092 |
1079 |
3082 |
1.76% |
150%，89% |
2.91% |
|
250 |
703 |
713 |
722 |
713 |
2851 |
1.33% |
150%，92% |
3.54% |
|
150 |
437 |
451 |
441 |
443 |
2952 |
1.61% |
211%，89% |
2.24% |
|
50 |
139 |
142 |
144 |
142 |
2835 |
2.21% |
162%，87% |
2.88% |
1. 计数重复性
在 50–1000 µL 的测试范围内，各体积条件下浓度结果（Count/mL）的 RSD 分布在 0.40–2.21%。其中 1000 µL 条件下 RSD 为 0.40%；最小体积 50 µL 条件下 RSD 为 2.21%（见表1）。从统计角度分析，进样体积降低意味着单次检测事件数相对减少，理论上会对统计稳定性产生一定影响。本次结果显示，在测试体积区间内，该影响处于可控范围内，说明系统在微量条件下仍能维持稳定的单颗粒识别与统计能力。
2. 计数准确性与体积一致性
各体积条件下的平均浓度结果分布在 2835–3082 粒/mL 区间内，均落入标准物质合格浓度范围 2593–3134 粒/mL（见表1）。不同体积条件下未观察到系统性偏移或异常放大/衰减趋势，说明体积变化未引入额外体积相关误差，浓度换算结果具备跨体积的一致性，可用于不同条件下的可比性判断。
3. 体积响应线性
颗粒总计数与进样体积呈高度线性相关，线性回归决定系数：R²≈0.999（见图表1）。高线性表明，在测试区间内体积变化与计数变化之间保持稳定比例关系。体积响应线性良好，是确保浓度换算准确性与方法可扩展性的关键基础。当实验条件需要缩小体积或调整检测策略时，线性稳定意味着系统响应可预测，不会因体积改变而产生不可解释偏差。
4. 分辨率验证（CP <0903> & USP <1788>）
除计数统计与体积响应外，本次验证还对各进样体积条件下的粒径分辨率进行了评估。结果显示，在 50–1000 µL 进样范围内，各体积条件下的 CP <0903>分辨率均满足 ≥68% 判定要求，USP <1788> 分辨率均低于 10% 判定标准，全部合格。
本次数据的 USP 分辨率结果分布在 2.24%–3.54% 区间，显著优于 10% 判定上限，说明在微量进样条件下系统未出现分辨率劣化，仍能够保持稳定的粒径分布解析能力。
为保证计算过程的透明性与一致性，本次 USP 分辨率采用光起科技开发的在线计算工具进行验证。该工具基于 USP <1788> 判定逻辑自动计算分辨率指标，可用于快速评估是否满足法规要求：
https://www.gqrayup.com/usp_1788_resolution_calculator
三、结论
综上所述，Acona 2000 SIS不溶性微粒检测仪在 50–1000 µL 微量进样范围内可保持：1）稳定的计数重复性；2）与标准物质一致的浓度结果；3）高度线性的体积响应；4）符合 CP <0903> 要求的分辨率表现；5）符合 USP <1788> 要求的分辨率表现。
对于样品量有限、需要在同一样品上并行多项测试的场景，可以在不显著增加样品消耗的前提下，仍可获得可比较、可解释的颗粒计数数据，为研发、工艺验证及日常质控提供稳定支持。
